Genomic DNA from 293

Human Genomic DNA from 293   基本信息

本产品来源于293细胞，基因组 DNA 可用于基因扩增、基因分析和类似应用。

产品浓度：    105 ng/ul ± 5%，溶于 10 mM Tris-HCl （pH8.0）、1 mM EDTA    

质量控制：

1. 分光光度计测量:  A260/A280 ≥1.8 ;A260/A230 ≥2.0
2. 完整性:  凝胶电泳测量；  DNA 分子中，超过 90% 的大小大于 50 kb。

存储条件：    2-8℃储存以方便频繁使用。偶尔使用请在 -20°C 下储存, 注意冻融不要超过 3 次。

安全等级：    0    

共享方式：    公益性共享    

操作步骤 ： 

  1.贴壁培养的细胞应先处理为细胞悬液，然后10000rpm(11200g)离心1min，倒尽上清，加200μL缓冲液GA，振荡至彻底悬浮； 

  2.加入20μL Proteinase K溶液，混匀； 

  3.加入200μL缓冲液GB，充分颠倒混匀，70℃放置10min，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠； 

  4.加人200μL无水乙醇，充分振荡混匀15sec，此时可能会出现絮状沉淀，简短离心以去除管盖内壁的水珠； 

  5.将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中（吸附柱放入收集管中），12000rpm(13400g)离心30sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放回收集管中； 

  6.向吸附柱CB3中加入500μL缓冲液GD（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm(13,400g)离心30sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中； 

  7.向吸附柱CB3中加入600μL漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm(13400g)离心30sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中； 

  8.重复操作步骤7； 

  9.将吸附柱CB3放回收集管中，12000rpm(13,400g)离心2min，倒掉废液。将吸附柱CB3置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液； 

  10.将吸附柱CB3转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200μL洗脱缓冲液TE，室温放置2-5min，12000rpm(13400g)离心2min，将溶液收集到离心管中；