DH10B化学转化感受态
DH10B 化学转化感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌DH10B（基因型：F- _mcr_A Δ(_mrr_-_hsd_RMS-_mcr_BC) φ80_lac_
DH10B 化学转化感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌DH10B（基因型：F- _mcr_A Δ(_mrr_-_hsd_RMS-_mcr_BC) φ80_lac_
产品简介
本品为大肠杆菌DH10B（基因型：F- _mcr_A Δ(_mrr_-_hsd_RMS-_mcr_BC) φ80_lac_ZΔM15Δ_lac_X74 _rec_A1 _end_A1 _ara_D139 Δ(ara, leu)7697 _gal_E15 _gal_K λ-_rps_L _nup_G）制作的高效感受态，菌株来源于MC1061菌株，mcrA、mcrBC及 mrr突变使DH10B菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA (Therefore , genomic DNA , both prokaryotic and eukaryotic, can be cloned efficiently in DH10B)。recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。φ80_lac_Z?M15的存在使DH10B可用于蓝白斑筛选，rpsL赋予其链霉素抗性。DH10B感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>108 cfu/μg DNA。
产品规格
品名 | 规格 |
DH10B化学转化感受态 | 10×100 μL |
50×100 μL |
保存条件：-80℃（12个月）
转化方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5 min，加入目的质粒或连接产物，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育30min；
2. 放42℃水浴锅中热激90 s，立即插入冰中静置2-3 min；
3. 添加900 μL LB液体培养基，37℃摇床220 rpm培养60 min；
4. 离心（质粒转化无需离心，吸取100μL菌液涂布即可），倒掉上清，余下菌液均匀涂布抗性平板，37℃培养箱放置过夜。
注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用，不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞，用手指轻弹混匀即可。
3. 质粒使用量<50 ng即可获得很好的转化。
