Stable化学转化感受态
Stable 化学转化感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌Stable（基因型：F' _pro_A+B+ _lac_Iq ?(_lac_Z)M15 zzf:
Stable 化学转化感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌Stable（基因型：F' _pro_A+B+ _lac_Iq ?(_lac_Z)M15 zzf:
产品简介
本品为大肠杆菌Stable（基因型：F' _pro_A+B+ _lac_Iq ?(_lac_Z)M15 zzf::Tn10 (TetR) ?(ara-leu) 7697 _ara_D139 _fhu_A ?_lac_X74 _gal_K16 _gal_E15 e14- _Φ80dlac_Z?M15 _rec_A1 _rel_A1 _end_A1 _nup_G _rps_L (StrR) _rph spo_T1 ?(_mrr-hsd_RMS -_mcr_BC)）制作的高效感受态，菌株是NEB公司开发的高转化效率菌株，是逆转录病毒/慢病毒载体系统推荐使用的菌株，特别适合慢病毒或具有末端重复序列DNA片段的克隆。基因组含有重组酶recA1 rel A1突变，可有效抑制长片段末端重复区的重组，降低错误重组的概率；同时含有核酸酶endA1突变，避免了提取质粒过程中核酸酶的污染，大大提高了高纯度病毒质粒的产量和质量。lacZΔM15的存在使Stable可用于蓝、白斑筛选，此菌株具有四环素和链霉素抗性，Stable感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>5×108 cfu/μg DNA。
产品规格
品名 | 规格 |
Stable化学转化感受态 | 10×100 μL |
50×100 μL |
保存条件：-80℃（12个月）
转化方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5 min，加入目的质粒或连接产物，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育30min；
2. 放42℃水浴锅中热激90 s，立即插入冰中静置2-3 min；
3. 添加900 μL LB液体培养基，37℃摇床220 rpm培养60 min（当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率）；
4. 离心（质粒转化无需离心，吸取100μL菌液涂布即可），倒掉上清，余下菌液均匀涂布抗性平板，37℃培养箱放置过夜（当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率）。
注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用，不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞，用手指轻弹混匀即可。
3. 质粒使用量<50 ng即可获得很好的转化。
