DH10B T1化学转化感受态
DH10B T1 化学转化感受态细胞产品简介大肠杆菌DH10B T1中的tonA突变赋予了该菌对噬菌体T1和T5的抗性，可以保护宝贵的文库免受污染。此外，甲基化
DH10B T1 化学转化感受态细胞产品简介大肠杆菌DH10B T1中的tonA突变赋予了该菌对噬菌体T1和T5的抗性，可以保护宝贵的文库免受污染。此外，甲基化
DH10B T1 化学转化感受态细胞
产品简介
大肠杆菌DH10B T1中的tonA突变赋予了该菌对噬菌体T1和T5的抗性，可以保护宝贵的文库免受污染。此外，甲基化依赖的限制系统(mcrA、mcrBC和mrr)的突变使DH10B T1成为构建原核和真核基因组文库的理想选择。该菌株还具有ΔlacZM15基因型，因此可以在含有X-Gal的平板上进行蓝/白筛选。该菌株的化学感受态效率不高，常使用电转化感受态；经pUC18质粒转化检测，DH10B T1化学感受态细胞的转化效率达107 cfu/μg DNA以上。
基因型：F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG tonA
产品组成
DH10B T1 化学感受态细胞 10 × 100 μL 100 × 100 μL
存储条件
-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；
2. 将待转化DNA加入到100 μL感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育30 min；
3. 将离心管置于42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激90s后，立刻置于冰浴中静置2-3 min；
4. 向离心管中加入900 μL LB或SOC培养基（室温或37 ℃预热），后置于37 ℃摇床复壮45 min；
5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；
2. 加入的待转化DNA的总体积不应超过感受态细胞体积的1/10；
3. 加入待转化DNA后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；
4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。
