JM330化学转化感受态
JM330 化学感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌JM330(基因型：F- _φ80 lac_Z?M15 ?(_lac_ZYA-_arg_F)U169 _rec_
JM330 化学感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌JM330(基因型：F- _φ80 lac_Z?M15 ?(_lac_ZYA-_arg_F)U169 _rec_
产品简介
本品为大肠杆菌JM330（基因型：F- _φ80 lac_Z?M15 ?(_lac_ZYA-_arg_F)U169 _rec_A1 _end_A1 _hsd_R17(rk-, mk+) _pho_A _sup_E44 λ- _thi_-1 _gyr_A96 _rel_A1 _ton_A）制作的高效感受态，来源于DH5α菌株。在DH5α大肠杆菌基因组中引入tonA，赋予其抗噬菌体 T1、T5的能力，即为JM330。JM330菌株最大的特点是其可以在体内特异性降解甲基化质粒模板，广泛应用于各种DNA定点突变试验中。JM330菌株缺失核酸内切酶(endA1)和重组酶(recA1)，提高了质粒DNA的产量和质量；lacZΔM15 的存在使JM330可用于蓝、白斑筛选。JM330感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19 质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>1×108 cfu/μg DNA。
产品规格
品名 | 货号 | 规格 |
JM330化学转化感受态 | EC018H-S | 10×100 μL |
EC018H-M | 50×100 μL |
保存条件：-80℃（12个月）
转化方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5 min，加入目的质粒或连接产物，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育30min；
2. 放42℃水浴锅中热激90 s，立即插入冰中静置2-3 min；
3. 添加900 μL LB液体培养基，37℃摇床220 rpm培养60 min；
4. 离心（质粒转化无需离心，吸取100μL菌液涂布即可），倒掉上清，余下菌液均匀涂布抗性平板，37℃培养箱放置过夜。
注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用，不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞，用手指轻弹混匀即可。
3. 质粒使用量<50 ng即可获得很好的转化。
