XL1-Blue MRF` Kan 化转感受态
XL1-Blue MRF` Kan 化学转化感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌XL1-Blue MRF` Kan（基因型：Δ(_mcr_A)183 Δ(_mcr_
XL1-Blue MRF` Kan 化学转化感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌XL1-Blue MRF` Kan（基因型：Δ(_mcr_A)183 Δ(_mcr_
产品简介
本品为大肠杆菌XL1-Blue MRF` Kan（基因型：Δ(_mcr_A)183 Δ(_mcr_CB-_hsd_SMR-mrr)173 _end_A1 _sup_E44 _thi_-1 _rec_A1 _gyr_A96 _rel_A1 lac [F' _pro_AB_lac_IqZΔM15 Tn5 (KanR)]）制作的高效感受态，菌株来源于XL1-Blue株系，是限制酶系统缺失型[Δ(_mcr_A)183, Δ(_mcr_CB-_hsd_SMR-mrr)173]，且具有卡那霉素抗性(KanR)，可转化具有氯霉素或四环素抗性的质粒。recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。hsdR17突变导致EcoK核酸内切酶系统缺失，增强了外源DNA的稳定性和提取质量。_lac_IqZΔM15的存在使XL1-Blue MRF’Kan菌株可用于蓝、白斑筛选。XL1-Blue MRF’Kan感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>108 cfu/μg DNA。
产品规格
品名 | 规格 |
XL1-Blue MRF` Kan化学转化感受态 | 10×100 μL |
50×100 μL |
保存条件：-80℃（12个月）
转化方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5 min，加入目的质粒或连接产物，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育30min；
2. 放42℃水浴锅中热激90 s，立即插入冰中静置2-3 min；
3. 添加900 μL LB液体培养基，37℃摇床220 rpm培养60 min；
4. 离心（质粒转化无需离心，吸取100μL菌液涂布即可），倒掉上清，余下菌液均匀涂布抗性平板，37℃培养箱放置过夜。
注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用，不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞，用手指轻弹混匀即可。
3. 质粒使用量<50 ng即可获得很好的转化。
4. XL1-Blue MRF’Kan 感受态细胞具有卡那霉素抗性，不可转化具有卡那霉素抗性的质粒。
