BLR(DE3)pLysS化学转化感受态
BLR(DE3)pLysS 化学转化感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌BLR(DE3)pLysS{基因型：F- _omp_T _hsd_SB(rB- mB-) g
BLR(DE3)pLysS 化学转化感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌BLR(DE3)pLysS{基因型：F- _omp_T _hsd_SB(rB- mB-) g
产品简介
本品为大肠杆菌BLR(DE3)pLysS{基因型：F- _omp_T _hsd_SB(rB- mB-) gal dcm (DE3)Δ(_srl_-_rec_A)306::Tn10 pLysS(CamR, TetR) }制作的感受态。该菌种是BLR(DE3)菌株的衍生菌株，_rec_A突变有利于原核表达质粒的稳定（适合含有不稳定DNA或重复DNA序列的基因的蛋白表达）。该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区(DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶，整合于大肠杆菌的染色体上），可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。该菌株携带的pLysS质粒含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰IPTG诱导的表达，适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。BLR(DE3)pLysS菌株具有四环素，氯霉素抗性。BLR(DE3) pLysS 感受态细胞由特殊工艺制作，pUC19质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>1×108 cfu/μgDNA。
产品规格
品名 | 规格 |
BLR(DE3)pLysS化学转化感受态 | 10×100 μL |
50×100 μL |
保存条件：-80℃（12个月）
转化方法
1. 从-80 ℃ 冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5 min，加入目的质粒，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育30min；
2. 放42℃ 水浴锅中热激90 s，立即插入冰中静置2-3 min；
3. 添加900 μL LB液体培养基，37℃摇床220 rpm培养60 min；
4. 吸取100μL菌液均匀涂布抗性平板，37℃培养箱放置过夜。
注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用，不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞，用手指轻弹混匀即可。
3. 诱导蛋白表达时，IPTG 浓度可选（0.1-2 mM 均可）。
