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BLR(DE3)化学转化感受态

BLR(DE3) 化学转化感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌BLR(DE3){基因型:F- _omp_T _hsd_SB(rB- mB-) gal dcm (D

360
数量:
货号:C0622           

BLR(DE3) 化学转化感受态细胞


产品简介

本品为大肠杆菌BLR(DE3){基因型:F- _omp_T _hsd_SB(rB mB-) gal dcm (DE3) Δ(_srl_-_rec_A)306::Tn10 (TetR) }制作的感受态。该菌种是BL21(DE3)菌株的衍生菌株,_rec_A突变有利于原核表达质粒的稳定(适合含有不稳定DNA或重复 DNA序列的基因的蛋白表达)。该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区(DE3区含有 T7噬菌体RNA聚合酶,整合于大肠杆菌的染色体上),可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达。BLR(DE3)菌株具有四环素抗性。BLR(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作,pUC19 质粒(2686bp,AmpR)检测转化效率>1×108 cfu/μg DNA。


产品规格

品名

货号

规格

BLR(DE3)化学转化感受态

EE003-H-S

10×100 μL


EE003-H-M

50×100 μL

-80℃(12个月)


转化方法

1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞,放入冰中5 min,加入目的质粒,轻弹使混合均匀,并在冰中孵育30min;

2. 放42℃水浴锅中热激90 s,立即插入冰中静置2-3 min;

3. 添加900 μL LB液体培养基,37℃摇床220 rpm培养60 min;

4. 吸取100μL菌液均匀涂布抗性平板,37℃培养箱放置过夜。

注意事项

1. 感受态细胞解冻后应立即使用,不可在冰中放置过长时间。

2. 不能用移液器抽吸感受态细胞,用手指轻弹混匀即可。

3. 诱导蛋白表达时,IPTG 浓度可选(0.1-2 mM 均可)。

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