BLR(DE3)化学转化感受态
BLR(DE3) 化学转化感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌BLR(DE3){基因型:F- _omp_T _hsd_SB(rB- mB-) gal dcm (D
BLR(DE3) 化学转化感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌BLR(DE3){基因型:F- _omp_T _hsd_SB(rB- mB-) gal dcm (D
产品简介
本品为大肠杆菌BLR(DE3){基因型:F- _omp_T _hsd_SB(rB- mB-) gal dcm (DE3) Δ(_srl_-_rec_A)306::Tn10 (TetR) }制作的感受态。该菌种是BL21(DE3)菌株的衍生菌株,_rec_A突变有利于原核表达质粒的稳定(适合含有不稳定DNA或重复 DNA序列的基因的蛋白表达)。该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区(DE3区含有 T7噬菌体RNA聚合酶,整合于大肠杆菌的染色体上),可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达。BLR(DE3)菌株具有四环素抗性。BLR(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作,pUC19 质粒(2686bp,AmpR)检测转化效率>1×108 cfu/μg DNA。
产品规格
品名 | 货号 | 规格 |
BLR(DE3)化学转化感受态 | EE003-H-S | 10×100 μL |
EE003-H-M | 50×100 μL |
-80℃(12个月)
转化方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞,放入冰中5 min,加入目的质粒,轻弹使混合均匀,并在冰中孵育30min;
2. 放42℃水浴锅中热激90 s,立即插入冰中静置2-3 min;
3. 添加900 μL LB液体培养基,37℃摇床220 rpm培养60 min;
4. 吸取100μL菌液均匀涂布抗性平板,37℃培养箱放置过夜。
注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用,不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞,用手指轻弹混匀即可。
3. 诱导蛋白表达时,IPTG 浓度可选(0.1-2 mM 均可)。