BL21-Star(DE3)pLysS化学转化感受态
BL21-Star (DE3) pLysS 化学转化感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌BL21-Star (DE3) pLysS{基因型：F- _omp_T _
BL21-Star (DE3) pLysS 化学转化感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌BL21-Star (DE3) pLysS{基因型：F- _omp_T _
产品简介
本品为大肠杆菌BL21-Star (DE3) pLysS{基因型：F- _omp_T _hsd_SB(rB- mB- ) gal dcm _rne_131 (DE3)pLysS (CamR)}制作的感受态。BL21 Star(DE3)pLysS菌株来源于BL21(DE3)，含有_rne_131突变（RNaseE基因），RNaseE基因的突变降低了?源 RNase 的积累，增强菌株细胞内 mRNA 的稳定性，从而提高异源蛋白的表达水平。主要适用于T7启动子表达载体(如pET系列)的高水平蛋白表达，同时含有大肠杆菌RNA聚合酶，也可用于非T7启动子表达载体（pGEX，pMAL等）的蛋白表达。由于BL21 Star(DE3)菌株的异源基因基础表达水平较高，所以不适合毒性蛋白的表达。BL21 Star(DE3)pLysS 菌株携带 pLysS质粒，具有氯霉素抗性。pLysS 含有表达T7溶菌酶的基因，T7溶菌酶可以作用于大肠杆菌细胞壁上的肽聚糖溶解大肠杆菌，还可与T7RNA聚合酶结合抑制其转录活性，进而降低目的基因的背景表达水平，但不干扰IPTG诱导的表达。pLysS质粒含有p15A复制起始子，可 以和含有pUC或pBR322等复制起始子的质粒兼容。BL21 Star(DE3)pLysS 感受态细胞由特殊工艺制作， pUC19质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>107 cfu/μg DNA。
产品规格
品名 | 货号 | 规格 |
BL21 Star(DE3)化学转化感受态 | EE010-H-S | 10×100 μL |
EE010-H-M | 50×100 μL |
保存条件：-80℃（12个月）
转化方法
1. 从-80 ℃ 冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5 min，加入目的质粒，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育30min；
2. 放42℃ 水浴锅中热激90 s，立即插入冰中静置2-3 min；
3. 添加900 μL LB液体培养基，37℃ 摇床200 rpm培养60 min；
4. 吸取100μL菌液均匀涂布抗性平板（若质粒浓度较高，需要稀释后涂板），37℃培养箱放置过夜。
注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用，不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞，用手指轻弹混匀即可。
3. 诱导蛋白表达时，IPTG 浓度可选（0.1-2 mM 均可）。
