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AaCas12b

AaCas12b源自酸性脂环酸芽孢杆菌(Alicyclobacillus acidiphilus),是一种属于CRISPR type V-B中的双RNA介导的DNA内切酶。

1260
规格P: 100 pmoL 1000 pmoL
数量:
货号:E0806H1      

AaCas12b 核酸内切酶

产品概述

AaCas12b源自酸性脂环酸芽孢杆菌(Alicyclobacillus acidiphilus),是一种属于CRISPR type V-B中的双RNA介导的DNA内切酶,具有比Cas12a更短的PAM序列(-TTN),以及更高的spacer的特异性(20nt),在单链向导RNA引导下与靶DNA结合,对靶标序列进行切割后,还会对体系内其它的单链核酸进行持续高效的切割——这种比靶核酸切割活性高约10倍的“反式”活性,结合经过标记的ssDNA报告探针,可被应用于核酸检测过程中的报告信号放大。从反应能力来看,AaCas12b识别的底物包括双链和单链的DNA,除了双链DNA的识别依赖NTS上游的PAM的区别之外,单双链靶标的反应效率并无显著差异。与Cas12a相比,AaCas12b的耐受温度范围更宽,其最佳反应温度在30~60℃,更适合与LAMP类的等温扩增反应同步进行。AaCas12b可使用工程化筛选过的单分子向导RNA进行反应,经我们深度优化筛选,单分子向导RNA的总长度可控制在105nt以内,非常适合高通量合成;也可以使用单碱基突变的tgRNA进行高特异性的SNP检测。



产品组分

组分

E0806H1 (100 pmol)

E0806H3(1,000 pmol)

AaCas12b Nuclease (10 μM) 

100 pmol

1,000 pmol

10 × AaCas12b Reaction Buffer

1 mL

1 mL

AaCas12b Nuclease 1000 pmol规格的浓度为10 μM,即10 pmol/μL,1000 pmol规格的总体积为100 μL


反应体系

推荐用量/终浓度

10 ×   Cas12a Reaction Buffer

2.5 μL

Reporter (fluorescence

100~1000 nM(推荐200 nM

crRNA

20ng~200 ng

AaCas12b 蛋白

20~150 ng

上一步反应的扩增产物

靶标DNA> 1E7copies(推荐 > 1E9 copies

H2O

补足至25 μL


保存条件

组分-20℃储存;≤ 0℃运输。


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