AaCas12b
AaCas12b源自酸性脂环酸芽孢杆菌（Alicyclobacillus acidiphilus），是一种属于CRISPR type V-B中的双RNA介导的DNA内切酶。
AaCas12b源自酸性脂环酸芽孢杆菌（Alicyclobacillus acidiphilus），是一种属于CRISPR type V-B中的双RNA介导的DNA内切酶，具有比Cas12a更短的PAM序列（-TTN），以及更高的spacer的特异性（20nt），在单链向导RNA引导下与靶DNA结合，对靶标序列进行切割后，还会对体系内其它的单链核酸进行持续高效的切割——这种比靶核酸切割活性高约10倍的“反式”活性，结合经过标记的ssDNA报告探针，可被应用于核酸检测过程中的报告信号放大。从反应能力来看，AaCas12b识别的底物包括双链和单链的DNA，除了双链DNA的识别依赖NTS上游的PAM的区别之外，单双链靶标的反应效率并无显著差异。与Cas12a相比，AaCas12b的耐受温度范围更宽，其最佳反应温度在30~60℃，更适合与LAMP类的等温扩增反应同步进行。AaCas12b可使用工程化筛选过的单分子向导RNA进行反应，经我们深度优化筛选，单分子向导RNA的总长度可控制在105nt以内，非常适合高通量合成；也可以使用单碱基突变的tgRNA进行高特异性的SNP检测。
组分 | E0806H1 (100 pmol) | E0806H3(1,000 pmol) |
AaCas12b Nuclease (10 μM) | 100 pmol | 1,000 pmol |
10 × AaCas12b Reaction Buffer | 1 mL | 1 mL |
AaCas12b Nuclease 1000 pmol规格的浓度为10 μM，即10 pmol/μL，1000 pmol规格的总体积为100 μL
名称 | 推荐用量/终浓度 |
10 × Cas12a Reaction Buffer | 2.5 μL |
Reporter (fluorescence） | 100~1000 nM（推荐200 nM） |
crRNA | 20ng~200 ng |
AaCas12b 蛋白 | 20~150 ng |
上一步反应的扩增产物 | 靶标DNA> 1E7copies（推荐 > 1E9 copies） |
H2O | 补足至25 μL |
组分-20℃储存；≤ 0℃运输。
